细胞培养室不同于其他实验室,要求在无菌条件下进行实验。所以每位做细胞培养的同人都要严格无菌操作,保持无微生物污染,以便实验顺利进行。
一、 准备室
1、 严格遵守培养器皿的洗刷、浸酸和消毒制度。
2、 准备室分污染区和清洁区,污染区:是待清洗的器皿。清洁区:是器皿浸酸经水冲洗干净后,待消毒的器皿。
3、 塑料制品勿用高压锅或烤箱消毒,可包装好后用钴60照射消毒。
4、 培养瓶盖、橡胶塞子和细胞过滤器,要求分装包裹后用高压锅消毒0.15mpa 20分钟。
5、 玻璃器皿可用烤箱消毒(160℃ 2.5-3小时)
6、 使用高压锅消毒要按规定操作,有专人看管,以保证安全。
二、 观察和操作室
1、 进入操作室必须戴好口罩、帽子和鞋套(或换好拖鞋)方可入内。
2、 实验前洁净台要紫外线消毒30-40分钟,并登记在登记本上。
3、 正确使用细胞室的各种仪器
a、 显微镜: 按显微镜使用须知操作。
b、 离心机:使用前要将待离物品平衡好后再离心,拨动旋钮要慢。
c、 二氧化碳培养箱:(1)开关门要快,不可将门长时间敞开着。
(2)培养液如果洒在培养箱内要及时清洁(用75%酒精或0。1%新洁尔灭)以防细菌污染。
(3)培养箱内水盘每周换一次,由值周人员负责。
4、细胞在培养过程中,如果发现瓶内液体浑浊,请不要打开瓶盖,及时处理,以防污染。
5、实验结束后用75%酒精清洁台面,将实验物品摆放整齐,及时清洗用过的器皿。
6、如果发现问题及时找工作人员联系。