timi天美传孟若羽

　　免疫组化室安全守则

　　1. 来此室做实验必须经过中心实验室的同意，必须遵守中心实验室的一切规定

　　2. 小心使用仪器，用必进行登记。

　　3. 不能使用明火，以免引燃有机试剂。

　　4. 如晚上做实验需要提前说明。

　　5. 最后离开时，必须关上机器、关上电源。

　　6. 保管好个人物品，一切自带物品丢失责任自负。

　　免疫组化室注意事项：

　　1. 使用冰冻切片机者应购买一次性刀片及借用冰冻圆托。

　　2. 自己准备好冻存的标本及OCT，和涂有防脱片剂的载玻片。

　　3. 使用结束后应清理干净所有残渣，刀位调至中位处，在一般情况下维持

　　在–10℃左右，不必关机。

　　免疫组化室安全操作流程：

　　1. 冰冻切片保存于–70℃，用冰甲醇及丙酮各固定5分钟。石蜡切片用

　　二甲苯脱蜡，用乙醇及笔叠厂洗后加入修复液，在微波炉中修复抗原。

　　2. PBS洗片后用封闭液封闭一小时，用生物素标记的二抗者需先用H2O2

　　阻断内源性过氧化物酶。

　　3. PBS洗标本后加入一抗在室温下作用一小时。

　　4. 用清洗液洗三次，每次5分钟。

　　5. 加入二抗，室温下作用一小时。

　　6. 在清洗液中洗三次，每次5分钟。

　　7. 若二抗为荧光抗体应在暗盒中操作及保存，然后用荧光显微镜照相。

　　8. 若二抗为生物素标记，应该用链亲和素结合的辣根过氧化酶再作用一小时，然后清洗3次，每次5分钟，然后用DAB显色。

　　若二抗为辣根过氧化物酶标记，则用顿础叠显色。

　　若二抗为碱磷酶标记，则用狈叠罢/叠颁滨笔显色。

　　显色后用伊红或苏木精复染，封片。

　　荧光显微镜使用注意事项：

　　1. 必须经过负责老师的同意方能使用显微镜，不能擅自使用。

　　2. 显微镜关机后如需使用必须间隔30分钟以上。

　　3. 因显微镜灯泡属消耗品，希望使用时节约时间，以增加灯泡寿命。

　　4. 不能使用移动硬盘和U盘，以免将病毒带入。

　　5. 收费标准：透射光 30元/小时;荧光 50元/小时;最少使用时间为30分钟。光盘5元/每张。

　　6. 希望大家爱护仪器，小心使用。